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大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書
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  大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒技術(shù)說明書

  BS-2924 大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒

  一、產(chǎn)品概述

  本試劑盒采用雙抗體夾心法,用于定量檢測大鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣本中的白三烯B4(LTB4)水平。LTB4是花生四烯酸代謝產(chǎn)物,在炎癥反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用?1。

  二、檢測原理

  ?包被抗體?:微孔板預(yù)包抗大鼠LTB4單克隆抗體?1?樣本孵育?:樣本中的LTB4與包被抗體結(jié)合

  ?酶標(biāo)抗體?:加入生物素化的檢測抗體形成復(fù)合物?2?顯色反應(yīng)?:加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,TMB底物顯色?1?終止反應(yīng)?:加入終止液終止反應(yīng)

  ?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值呈正相關(guān)?1三、試劑盒組成

  組分規(guī)格保存條件

  預(yù)包被微孔板96孔2-8℃

  標(biāo)準(zhǔn)品(凍干)6管(1000-0pg/mL)-20℃

  樣本稀釋液15mL室溫

  生物素化抗體(100×)120μL-20℃

  酶標(biāo)復(fù)合物12mL2-8℃

  TMB顯色液(A/B)各6mL2-8℃避光

  終止液12mL室溫

  20×洗滌液60mL室溫

  四、樣本處理

  ?血清/血漿樣本?:

  使用EDTA/肝素抗凝管采集

  2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘

  避免溶血樣本,2-8℃保存≤48小時,長期保存需-20℃?2?細胞培養(yǎng)上清?:

  離心去除細胞碎片

  可直接檢測或適當(dāng)稀釋

  五、實驗步驟

  ?試劑準(zhǔn)備?:

  洗滌液:用蒸餾水1:20稀釋濃縮液?2標(biāo)準(zhǔn)品:用樣本稀釋液配制梯度濃度(1000-0pg/mL)

  酶標(biāo)抗體工作液:按說明書比例稀釋

  ?操作流程?:

  加樣(100μL/孔) → 37℃孵育90分鐘 → 洗滌4次

  加酶標(biāo)抗體(100μL/孔) → 37℃孵育60分鐘 → 洗滌4次

  加TMB顯色液(100μL/孔) → 避光顯色15-20分鐘

  加終止液(50μL/孔) → 10分鐘內(nèi)測定OD值

  六、技術(shù)參數(shù)

  ?檢測范圍?:62.5-1000pg/mL

  ?靈敏度?:≤1.0pg/mL

  ?精密度?:批內(nèi)CV<10%,批間CV<15%

  ?回收率?:85%-115%

  ?特異性?:與結(jié)構(gòu)類似物無交叉反應(yīng)

  七、注意事項

  實驗前所有試劑需平衡至室溫

  以防試劑間交叉污染,使用一次性槍頭

  顯色反應(yīng)時間需嚴格控制,避免過度顯色

  酶標(biāo)儀需提前預(yù)熱,建議使用雙波長(450/630nm)檢測

  本產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床診斷

  八、儲存條件

  未開封試劑盒:2-8℃保存,有效期6個月

  開封后組分:按說明書要求分別保存

  注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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