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　　如何正確使用Roche 480配套PCR板?避免交叉污染與信號(hào)干擾的實(shí)操指南

　　以下是天津本生使用Roche 480配套PCR板時(shí)避免交叉污染與信號(hào)干擾的詳細(xì)操作指南：

　　一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備?

　　耗材選擇?

　　必須使用與LightCycler® 480匹配的96孔PCR板(推薦半裙邊白色板)。

　　選擇專用光學(xué)封板膜，確保密封性并減少熒光背景干擾。

　　滅菌處理?

　　新開封的PCR板需紫外線照射15分鐘或高壓滅菌(若材料允許)。

　　操作臺(tái)和移液器需用75%乙醇擦拭消毒。

　　二、反應(yīng)體系配置?

　　加樣規(guī)范?

　　反應(yīng)液需在冰上配制，避免高溫降解。

　　每孔體積嚴(yán)格控制在20μL(誤差<1μL)，使用低吸附吸頭分裝。

　　防污染措施?

　　分區(qū)操作：核酸提取、體系配制、PCR擴(kuò)增需在不同超凈臺(tái)進(jìn)行。

　　每加樣一次更換吸頭，避免氣溶膠污染。

　　三、封板與離心?

　　密封操作?

　　封膜時(shí)需覆蓋孔口，輕壓邊緣排除氣泡。

　　禁止使用記號(hào)筆在板或膜上標(biāo)記(可能干擾熒光信號(hào))。

　　離心參數(shù)?

　　2000 rpm離心30秒，確保液體集中至孔底。

　　四、儀器操作?

　　裝板注意事項(xiàng)?

　　確認(rèn)板底清潔干燥，避免指紋或灰塵影響光學(xué)檢測(cè)。

　　放入儀器時(shí)對(duì)準(zhǔn)托架卡槽，避免傾斜。

　　程序設(shè)置?

　　熱蓋溫度設(shè)為105°C，防止蒸發(fā)。

　　熒光采集通道需與染料匹配(如FAM通道用于SYBR Green)。

　　五、實(shí)驗(yàn)后處理?

　　數(shù)據(jù)保存?

　　使用光盤刻錄原始數(shù)據(jù)，避免U盤傳輸導(dǎo)致文件損壞。

　　耗材廢棄?

　　PCR板為一次性使用，禁止剪開重復(fù)利用。

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即帶離實(shí)驗(yàn)室，按生物危害廢物處理。

　　關(guān)鍵問題規(guī)避?

　　交叉污染?：

　　操作全程佩戴無粉手套;

　　每批次實(shí)驗(yàn)預(yù)留至少2孔陰性對(duì)照。

　　信號(hào)干擾?：

　　白色PCR板可減少背景熒光;

　　避免強(qiáng)光直射反應(yīng)板。

　　通過規(guī)范操作流程和嚴(yán)格分區(qū)管理，可顯著提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性。

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　　注：以上資料僅供參考，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。

　　天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來。